产科抗磷脂综合征(obstetric antiphospholipid syndrome, OAPS)是一种以病理妊娠为首要临床表现伴抗磷脂抗体(antiphospholipid antibodies, APLs)继续阳性为特征的非炎症性自身免疫病,发病机制尚不清晰。其病理妊娠包含重复前期流产、子痫或子痫前期、胎盘功用不全相关并发症及孕中晚期胎儿逝世等[1]。
主诉:外院确诊多囊卵巢综合征,雄激素水平高,掉发。曾有三次不良孕产史,流产安排均未行染色体检查。近半年月经不规则,周期1-2月不等,末次月经2022-12-14,停经一月余,近期未医治检查。
试验室检查成果:D-二聚体初度上机检测成果为8400μg/L,检查CS5100血凝仪机器报警信息,提示该标来历倍抗原过量,经仪器主动8倍稀释后得出该成果(图1,2)。
检查该患者HCG成果0.6 mIU/mL,患者并未处于妊娠状况,针对此反常增高成果,咱们榜首反响检查标本状况,发现标本状况正常,无溶血脂血乳糜和黄疸现象(图3)。
一起又问询了当天此标本的抽血工作人员,回想没有产生抽血不顺等状况。为了根究原因,咱们给患者加做了FDP项目,成果显现FDP小于2500μg/L(图4,5)。
D-二聚体是交联纤维蛋白在纤溶酶的效果下降解的最小产品,而FDP是交联纤维蛋白和非交联纤维蛋白纤溶的降解产品总称,理论上D-二聚体是FDP的一部分,假如一起检测,FDP的丈量值应该大于D-二聚体,现在出现了严峻倒置,一定是哪里出了问题!
回忆当天质控状况,D-二聚体、FDP等一切项目室内质控均在控,仪器安稳,试剂均为当天装备。那么,扫除标本和仪器的问题,该例D-二聚体是否是假阳性?咱们随即对该标本进行了手艺倍比稀释,成果显现,跟着稀释倍数的增高,D-二聚体数值出现不规则的改变。
至此,能够清晰该例D-二聚体检测中存在搅扰。所以咱们检查该患者的病历信息,注意到患者自诉曾有三次不良妊娠史,接诊医师除开具D-二聚体检测项目外,还开具了自身抗体检测及抗磷脂抗体检测,陈述未出。
考虑到极有可能是异嗜性抗体搅扰,咱们随即对该标本进行了二巯基乙醇(Dithiothreitol, DTT)纠正试验,运用0.001mol/L DTT试剂与血浆1:1在37°C反响10min后上机检测,D-二聚体检测值为120μg/L,乘以2倍的稀释倍数为240μg/L。
一起,咱们将该标本送至外院不同检测渠道检测,反应成果和咱们纠正后相符。所以咱们电话联络医师阐明“疑有异嗜性抗体搅扰,成果请结合临床剖析”后陈述。
几天后患者来院复诊,结合不良孕产史和抗磷脂相关抗体陈述中抗β2-糖蛋白1抗体-IgM抗体50.2AU/mL,抗心磷脂抗体-IgM9.72MPLU/mL,确诊产科抗磷脂综合征,临床给予达芙通和阿司匹林肠溶片医治,嘱下次月经2-5天复诊,后续咱们将继续重视此患者状况。
本事例中,扫除仪器及标本前处理的要素,结合患者既往史和临床医治状况,终究确定是由于异嗜性抗体存在导致的D-二聚体假阳性成果。那么,日常工作中怎么区分D-二聚体假阳性呢?
首要,要仔细阅读试验室检测体系触及的仪器、试剂等阐明书,了解检测原理及办法学局限性。D-二聚体的检测办法一般选用颗粒增强型免疫比浊法,该办法的原理是将单克隆抗体包被在乳胶颗粒上,当抗体与血浆中抗原结合构成复合物时,乳胶颗粒集合,依据浊度的改变核算抗原的浓度。
该查验办法的局限性:①当标本中有乳糜、溶血和黄疸时,会对吸光度形成搅扰,导致成果不牢靠。②患者体内存在较高浓度的类风湿因子(rheumatoid factor, RF),易与检测试剂中IgG抗体分子产生集合,产生额定的浊度改变,形成成果假性升高。③患者标本中含有异嗜性抗体,其有多个特异性结合位点,能与多种抗原或抗体结合,可使成果假性升高或下降。
因而,在日常的工作中,首要要确保标本的合格状况,必要时联络患者重抽复查。假如遇到由于类风湿因子引起的D-二聚体假性升高时,可在类风湿因子阳性标本中参加变性IgG中和类风湿因子,混匀后置于37°C,30分钟,离心取上清后再测D-二聚体[4]。
别的,一般状况下,比较于D-二聚体,FDP的检测办法学更为安稳。一方面是由于FDP的抗体结合位点较多,另一方面FDP的线性规模也更宽,FDP遭到搅扰的可能性大大下降。因而,当D-二聚体成果反常增高且和临床表现不符时,能够考虑加做FDP,扫除一部分D-二聚体的假阳性。
假如试验室有两套检测体系,当D-二聚体成果出现反常时,能够选用另一套检测体系进行复核。由于D-二聚体自身并非结构单一的物质,而是含有该结构的巨细不同的片段的混合物。不同检测体系运用的DD片段单克隆抗体不同,试剂中的乳胶颗粒功能均有差异,因而替换其他检测体系进行复查有时能够去除或削减搅扰物对D-二聚体检测的影响。尽管不同体系之间敏感度和参阅规模不同,可比性差,可是可做趋势性参阅。
除此之外,经过手艺倍比稀释的办法能够去除少数搅扰物的影响,假如搅扰物浓度过大,即便稀释倍数很高,仍然无法扫除,且稀释份额与成果不成线性联络,阐明丈量成果是不可信的,能够经过试剂配套的关闭试剂或许DTT进行纠正,假如纠正后D-二聚体康复与FDP的数量联络,阐明样本中存在异嗜性抗体搅扰[5]。DTT具有很强的还原性,能够损坏蛋白和多肽间的二硫键,而不影响D-二聚体之间的衔接。
近年来,OAPS的确诊率逐年上升,因而关于OAPS孕妈妈孕前咨询、全方面评价及个体化医治极为重要。假阳性的D-二聚体成果可能会导致误诊、过度医治或错失医治机遇、给患者形成心理压力。一份及时精确的陈述单,要求每个查验工作者对剖析前、中、后查验质量的严厉把控,才干更好的协助临床妥善办理OAPS孕妈妈,显着改进妊娠结局,削减母婴不良妊娠结局的产生。
1.D-二聚体反常增高且和临床表现不符时,主张加做FDP联合检测。单测D-二聚体,简单疏忽后带现象、嗜异性抗体等搅扰所造成的的假阳性成果。
2.标本处理的每一步都环环相扣,面临反常成果需求咱们镇定考虑,经过“扫除法”抽丝剥茧找到问题要害,终究给临床供给实在牢靠的试验成果。
3.活跃联络临床检查病史,不断培育临床思维能力,从试验确诊视点给临床供给医治思路。
[2] 田园,徐金凤,陈代娟.非经典抗磷脂抗体在产科抗磷脂综合征的确诊价值研究进展.有用妇产科杂志. 2022; 38: 270-3.
[3] 游,杨孜.抗磷脂综合征兼并妊娠及产科并发症的防备及处理.我国计划生育和妇产科. 2020; 12: 9-13.
[4]肖明锋,吴芝兰,刘基铎,刘光平,袁晴.类风湿因子对免疫比浊法测定D-二聚体成果的搅扰剖析.世界查验医学杂志. 2013; 34: 2443-4.
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